Spektrofotometre neden belirli bir dalga boyuna ayarlanmalıdır?
Spektrofotometre neden belirli bir dalga boyuna ayarlanmalıdır?

Video: Spektrofotometre neden belirli bir dalga boyuna ayarlanmalıdır?

Video: Spektrofotometre neden belirli bir dalga boyuna ayarlanmalıdır?
Video: Spektroskopi Yolculuğu-1 2024, Aralık
Anonim

ayarladığınızda dalga boyu üzerinde spektrofotometre , sen NS prizmanın veya kırınım ızgarasının konumunu değiştirerek farklı dalga boyları ışığın NS yarığa yönlendirilir. Yarık genişliği ne kadar küçük olursa, aletin çeşitli bileşikleri çözme yeteneği o kadar iyi olur.

Buna göre, spektrofotometre hangi dalga boyunda ayarlanacak?

Işık kaynağının dalga boyu aralığına bağlı olarak, iki farklı tipte sınıflandırılabilir: UV-görünür spektrofotometre: ultraviyole aralığında (185 - 400 nm) ve görünür aralıkta (400 - 700 nm ) elektromanyetik radyasyon spektrumu.

Aynı şekilde, dalga boyunu her değiştirdiğinizde neden spektrometreyi kalibre etmeniz gerekiyor? spektrofotometre olması gerekir kalibre edilmiş boş bir çözüme karşı yani o boş çözeltinin absorbansını sıfır referans olarak kullanabilir. Bir maddenin belirli bir maddenin ışığını absorbe etme kapasitesinin bir ölçüsüdür. dalga boyu.

Okumalar hangi dalga boyunda alınmalıdır?

Almak okumalar 5 nm aralıklarla bundan biraz önce ve sonra dalga boyu . Örneğin, maksimum absorbans 450 nm'de bulunursa, daha doğru bir sonuç elde etmek için okuma λmax, absorbans al okumalar 440, 445, 455 ve 460 nm'de.

Neden çözeltinin absorbansını 550 nm'de ölçüyorsunuz?

Proteinler alkali ortamda bakır iyonlarıyla reaksiyona girer. çözüm ışığı emen mor renkli bir kompleks oluşturmak için 550 nm . Bu nedenle, tarafından ölçme A550 kullanılarak kompleksin konsantrasyonu ( absorbans NS 550 nm ), sen ayrıca ölçme protein konsantrasyonu.

Önerilen: