İçindekiler:

Absorbanstan DNA konsantrasyonunu nasıl buluyorsunuz?
Absorbanstan DNA konsantrasyonunu nasıl buluyorsunuz?

Video: Absorbanstan DNA konsantrasyonunu nasıl buluyorsunuz?

Video: Absorbanstan DNA konsantrasyonunu nasıl buluyorsunuz?
Video: Gıda ve Analitik Kimya Ara Kesitinde Yeni bir Antioksidan Kapasite Tayin Yöntemi Olarak CUPRAC... 2024, Aralık
Anonim

DNA konsantrasyonu ölçülerek tahmin edilir absorbans 260 nm'de, A'nın ayarlanması260 bulanıklık ölçümü (ölçülen absorbans 320nm'de), seyreltme faktörü ile çarpılarak ve bir A'nın oluşturduğu ilişkiyi kullanarak260 1.0 = 50ug/ml saf dsDNA.

Aynı şekilde insanlar soruyor, DNA konsantrasyonunu nasıl buluyorsunuz?

Orijinal numunedeki DNA konsantrasyonunu belirlemek için aşağıdaki hesaplamayı yapın:

  1. dsDNA konsantrasyonu = 50 μg/mL × OD260 × seyreltme faktörü.
  2. dsDNA konsantrasyonu = 50 μg/mL × 0.65 × 50.
  3. dsDNA konsantrasyonu = 1,63 mg/mL.

Ayrıca, iyi bir DNA konsantrasyonu nedir? A iyi kalite DNA örnek A olmalıdır260/A280 1.7-2.0 oranı ve bir A260/A230 oranı 1.5'ten büyüktür, ancak farklı tekniklerin bu kirleticilere duyarlılığı değiştiğinden, bu değerler yalnızca numunenizin saflığı için bir kılavuz olarak alınmalıdır.

Bu şekilde DNA 280 nm'de absorbe olur mu?

260'da absorbans oranı nm vs 280 nm değerlendirmek için yaygın olarak kullanılan DNA protein çözeltilerinin kirlenmesi, çünkü proteinler (özellikle aromatik amino asitler) absorbe etmek ışık 280 nm.

DNA konsantrasyonu için NanoDrop'u nasıl kullanıyorsunuz?

Temel olarak nano damla size seçme seçeneği sunar DNA , RNA, Proteinler. seçmen gerek DNA , ardından 2 ΜL su (mili Q tercihli) koyun, ardından "Boş" seçeneğini seçin, ardından ölçümün 0 olduğunu doğrulamak için 2 ΜL su daha koyun. Ardından numunenizden 2 ΜL yerleştirin. Ölçüyü alacaksınız.

Önerilen: